Kweek- en plaatonderzoekprotocol voor zoogdier- en insectencellen

De platen vertegenwoordigen een dwarsdoorsnede van platen voor verschillende soorten testen, celgroei en opslag. Wij bieden verschillende formaten aan: 96 en 24 wells om aan uw behoeften te voldoen.

Protocol voor de screening van zoogdier- en insectencellen - 96-wellsplaten :

Materiaal :

96-well plaat, 2 ml, vierkante wells, ronde bodem, individueel verpakt met deksel, steriel : 931134
96-well-plaat, 2 ml, vierkante wells, piramidevormige bodem, individueel verpakt met deksel, steriel : 931133

Methode :

1. Bewaar de celvoorraden in een geschikt groeimedium. Verdeel de culturen de dag vóór de transfectie bij een geschikte dichtheid om te zorgen voor log-fase groei ten tijde van de transfectie.

2. Breng 500 ul / wells celsuspensie aan. De optimale zaaidichtheid hangt af van de cellijn; gebruik de aanbevolen dichtheid voor de gebruikte cellijn.

3. Transfecteer de cellen volgens het vastgestelde transfectieprotocol. Stel de verhouding tussen transfectiereagens en DNA vast op basis van die welke wordt gebruikt voor grootschalige culturen.

4. Sluit de platen af met plastic deksels of pakkingen en plaats ze een nacht op een schudapparaat bij 800 rpm en 37°C.

5. Oogst de cellen op het vastgestelde tijdstip voor kweken op grotere schaal. Pellet de cellen door centrifugeren bij 2500g gedurende 20 minuten bij 4°C.

6. Reserveer het kweekmedium of de pellet voor de toepassing en verwerking stroomafwaarts.

Opmerkingen :

De meest kritische factor voor de levensvatbaarheid van de cellen is beluchting. Optimale resultaten worden verkregen met shakers met een omloopdiameter van 3 mm. Wij raden af om in 96-wells-platen te werken met shakers met een standaarddiameter van 25 mm.
Thomson-filterplaten zijn een uitstekend aanvullend product voor downstream-zuiveringstoepassingen.

Filterplaat 96 wells, 2 ml | 25µm Polypropyleen: ref. 931919
Voorgestelde maximale centrifugatie: 3000 g.

Protocol voor de screening van zoogdier- en insectencellen - 24-wellsplaten :

Materiaal :

24-well-plaat, 10,4 ml, vierkante wells, ronde bodem, individueel verpakt met deksel, steriel: 931568
24-well-plaat, 10,8 ml, vierkante wells, piramidevormige bodem, individueel verpakt met deksel, steriel : 931571

Methode :

1. Bewaar de celvoorraden in een geschikt groeimedium. Verdeel de culturen de dag vóór de transfectie bij een geschikte dichtheid om te zorgen voor logfase groei op het moment van transfectie.

2. Voeg 4-5 ml / wells celsuspensie toe. De optimale zaaidichtheid hangt af van de cellijn; gebruik de aanbevolen dichtheid voor de gebruikte cellijn.

3. Transfecteer de cellen volgens het vastgestelde transfectieprotocol. Stel de verhouding transfectiereagens / DNA / voedingsstoffen vast op basis van die welke voor grootschalige culturen wordt gebruikt.

4. Sluit de platen af met plastic deksels of pakkingen en plaats ze een nacht in een schudmachine bij 800 rpm en 37°C.

5. Oogst de cellen op het vastgestelde tijdstip voor kweken op grotere schaal. Pellet de cellen door centrifugeren bij 2500 g gedurende 20 minuten bij 4°C.

6. Reserveer het kweekmedium of de pellet voor de toepassing en het proces downstream

Opmerkingen :

De meest kritische factor voor de levensvatbaarheid van de cellen is beluchting. Optimale resultaten worden verkregen met shakers met een omloopdiameter van 3 mm. Wij raden af om in 96-wells-platen te werken met shakers met een standaarddiameter van 25 mm.
Thomson-filtratieplaten zijn een uitstekend aanvullend product voor downstream-zuiveringstoepassingen.

24-wells filterplaat, 10,8 ml | 25µm Polypropyleen: ref. 921550